毫無(wú)疑問(wèn)，哺乳動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)是生物醫(yī)學(xué)研究中最重要的模型系統(tǒng)之一。盡管它們被廣泛使用，但哺乳動(dòng)物細(xì)胞相對(duì)脆弱并且需要特殊的生長(zhǎng)環(huán)境。這種環(huán)境幾乎全部由CO2培養(yǎng)箱提供。保持CO2培養(yǎng)箱正常運(yùn)行且無(wú)污染對(duì)于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的成功培養(yǎng)至關(guān)重要，以下幾點(diǎn)是二氧化碳培養(yǎng)箱使用注意事項(xiàng)：

1、避免污染

哺乳動(dòng)物細(xì)胞在富含營(yíng)養(yǎng)的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)基的溫度有利于幾乎所有不管是否需要的微生物的生長(zhǎng)。盡管許多研究人員在其培養(yǎng)基中使用抗生素和抗真菌劑作為預(yù)防污染的方法，但這并不能解決持續(xù)性的方法學(xué)錯(cuò)誤，而且往往會(huì)隱藏有問(wèn)題的事實(shí)。如果可能的話，避免使用這些藥劑，并努力改進(jìn)你的無(wú)菌技術(shù)并開(kāi)發(fā)一個(gè)能保持你的培養(yǎng)箱清潔干凈的系統(tǒng)。

培養(yǎng)箱的主要污染源是通過(guò)操作入口進(jìn)入的微生物。這可能是顯而易見(jiàn)的，但把它放在首位將有助于您養(yǎng)成良好的操作習(xí)慣，這對(duì)防止全面污染有很大的幫助。將培養(yǎng)物放入培養(yǎng)箱時(shí)，務(wù)必戴上手套，盡量縮短內(nèi)部玻璃門打開(kāi)的時(shí)間。不定期地用70％的乙醇擦拭門把手。每周更換一次保濕托盤中的水以保證其干凈。定期用肥皂和水擦洗保濕盤，然后用乙醇擦拭; 或者，對(duì)保濕盤進(jìn)行高壓滅菌。如果培養(yǎng)液溢出培養(yǎng)箱，請(qǐng)取下擱板并徹底清潔。

這些清潔儀式的頻率取決于培養(yǎng)箱的運(yùn)輸次數(shù)。大型實(shí)驗(yàn)室中的培養(yǎng)箱可能需要更頻繁的清潔。如果你從一個(gè)干凈的培養(yǎng)箱開(kāi)始，并注意進(jìn)出的物品，它應(yīng)該保持清潔數(shù)周或數(shù)月

2、37°C恒溫

鑒于我們?nèi)梭w核心溫度努力保持在37℃，因此培養(yǎng)基的哺乳動(dòng)物細(xì)胞在這個(gè)溫度下最舒適也就不足為奇了。大多數(shù)二氧化碳培養(yǎng)箱都配有一個(gè)顯示內(nèi)箱溫度的顯示器，但最好定期仔細(xì)檢查，特別是如果你注意到細(xì)胞生長(zhǎng)不理想或不典型。最好使用高質(zhì)量的校準(zhǔn)溫度計(jì)來(lái)完成。打開(kāi)外部和內(nèi)部培養(yǎng)箱門并將溫度計(jì)粘貼到玻璃門內(nèi)部，以便在玻璃門關(guān)閉時(shí)從外部讀取溫度。在您離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室之前，請(qǐng)執(zhí)行此操作。第二天早上，打開(kāi)培養(yǎng)箱的外門，讀取溫度計(jì)。如果這一次讀數(shù)不是37°C（并且溫度計(jì)準(zhǔn)確），你需要重新校準(zhǔn)機(jī)載的溫度傳感器。

培養(yǎng)箱顯示：精確的溫度和CO2控制，可實(shí)現(xiàn)高細(xì)胞產(chǎn)量和活力。

3．保持潮濕

培養(yǎng)箱的內(nèi)部保持在相對(duì)較高的溫度，因此培養(yǎng)基的水分蒸發(fā)將成為沒(méi)有高濕度的真正原因。通過(guò)將水保持在位于培養(yǎng)箱底部的托盤中，可以在培養(yǎng)箱內(nèi)保持較高的相對(duì)濕度（90％至95％）。這樣做的缺點(diǎn)是充水托盤是潛在的污染源（見(jiàn)上文）。

采用定期的維護(hù)和清潔計(jì)劃是保持CO2培養(yǎng)箱正常運(yùn)行且細(xì)胞無(wú)污染的最有效方法。

4、確保二氧化碳濃度標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)該是培養(yǎng)箱應(yīng)有的標(biāo)準(zhǔn)

大多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基使用碳酸氫鹽緩沖系統(tǒng)。CO2是該緩沖系統(tǒng)的重要組成部分，其濃度必須保持在5％才能使培養(yǎng)基保持在生理pH值。雖然基本上所有現(xiàn)代培養(yǎng)箱都配備了CO2傳感器來(lái)維持所需的CO2含量，但隨著時(shí)間的推移，校準(zhǔn)可能會(huì)偏離設(shè)定點(diǎn)，需要通過(guò)操作員（您）直接確定CO2濃度重新進(jìn)行偏移校準(zhǔn)。

測(cè)量培養(yǎng)箱中的CO2濃度最簡(jiǎn)單、最準(zhǔn)確的方法是使用氣體分析儀。這些儀器可以從許多科技型供應(yīng)商處購(gòu)買，并且可以用來(lái)設(shè)計(jì)成測(cè)量CO2或O2濃度的模型。氣體分析儀的工作原理是基于待測(cè)氣體化學(xué)吸收之后的液體體積膨脹。設(shè)備調(diào)零校準(zhǔn)是使用了CO2濃度為0.04%的室內(nèi)空氣，并且這種培養(yǎng)箱內(nèi)的空氣是通過(guò)培養(yǎng)箱門或側(cè)面的孔進(jìn)行取樣。

舊模型的培養(yǎng)箱可能需要更頻繁的重新校準(zhǔn)。最好的新型號(hào)每個(gè)月都會(huì)對(duì)CO2傳感器進(jìn)行零位校準(zhǔn)。雖然這些型號(hào)很少需要手動(dòng)重新校準(zhǔn)，但用戶仍應(yīng)根據(jù)其標(biāo)準(zhǔn)操作程序（SOP）的規(guī)定，使用Fyrite裝置檢查箱內(nèi)CO2濃度并校準(zhǔn)。

CO2傳感器，是培養(yǎng)箱正常工作最重要的一部分，因此必須重視起來(lái)，并且這個(gè)傳感器還要符合以上的要求，即抗高濕度，5%以上的寬量程，能工作在37℃環(huán)境下的，因此這里推薦SohaTech的SH-DS二氧化碳傳感器。其大致的參數(shù)特點(diǎn)和原理如下：

下面的就是SohaTech的SH-DS傳感器模塊，尺寸小，結(jié)構(gòu)易安裝，專用接口是連接更加可靠！

SH-DS具體參數(shù)如下：

檢測(cè)原理

雙光波非色散紅外原理 （NDIR）

檢測(cè)量程

0 ~ 25%

精度

±60 ppm ± 3 % ppm @ 0 ~ 50℃

數(shù)據(jù)更新

2秒每次

預(yù)熱時(shí)間@25℃

《 90sec

工作環(huán)境

-10 ~ 50℃， 0 ~ 99.5% RH （無(wú)凝露）

輸出

模擬輸出： 0~3VDC （0~25%）

數(shù)字輸出：9600bps TTL Level 3.3V

電源

DC 5V ~ 9V輸入 ，推薦值5~7V

功耗

平均 35mA，峰值 80mA

接口

4PIN Header［CN1］

Molex 5267 included With 2.54mm spacing.

Refer to Dimensions

尺寸大小

（W）40mm x （H）36mm x （D）11.9 mm，重量 ： 12g